發(fā)布日期：2025-06-12
肺癌，這個在我國乃至全球都令人聞之色變的“健康殺手”，長期霸占著發(fā)病率和病死率的榜首。盡管靶向與免疫治療等現(xiàn)代醫(yī)學手段給患者帶來了新希望，但術后復發(fā)與遠處轉移仍是制約長期生存率的關鍵因素，也成為每一位肺癌患者心中最深的恐懼。
在肺癌治療領域，微小病灶殘留（MRD）逐漸走入人們的視野。大量研究表明[1]，基于循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）的MRD比傳統(tǒng)的腫瘤標志物或影像學方法更具優(yōu)勢，能更早鑒定出肺癌患者術后復發(fā)的跡象，更早識別復發(fā)高風險患者，為提前干預創(chuàng)造寶貴機會，在肺癌患者的預后預測、復發(fā)風險評估及輔助治療指導等方面發(fā)揮著舉足輕重的作用。
目前，基于NGS的ctDNA突變檢測，是當下實體瘤MRD檢測的常用方法。但不得不說，MRD監(jiān)測的價格并不親民。市場上主流的MRD監(jiān)測套餐，多為1+n，需在兩年內完成，這樣一套下來價格萬元級別。若再增加監(jiān)測次數(shù)，費用還會水漲船高，這無疑給患者和家屬帶來了沉重的經(jīng)濟負擔。因此，如何實現(xiàn)術后患者高靈敏、低成本且動態(tài)化的MRD監(jiān)測，至今仍是精準醫(yī)學領域亟待攻克的核心難題。
在此背景下，基于數(shù)字PCR（dPCR）聯(lián)合NGS對原發(fā)腫瘤患者的常見驅動基因ctDNA進行MRD復發(fā)監(jiān)測逐漸成為一種可行性方法。盡管目前有多種NGS的Panel可供選擇，但由于很多基因或者位點的臨床意義不明確而被排除。非小細胞肺癌（NSCLC）占全部肺癌85%[2]，而表皮生長因子受體（EGFR）在NSCLC治療中是極為關鍵的靶點。相關研究表明，dPCR為攜帶常見驅動基因（如EGFR）的手術切除NSCLC患者的MRD檢測提供了一條可行路徑，其準確性也得到了相關分析結果的有力支撐。
《實體瘤分子殘留病灶檢測共識（2024年）》指出，基于NGS的MRD檢測因高通量、全面性和高靈敏度，成為當下主流。不過，基于dPCR的MRD個性化定制，能對低豐度ctDNA進行精準絕對定量，同樣具有獨特價值。
2024年《肺癌適應性治療中國專家共識》[3]首次推薦ctDNA-MRD作為適應性治療的標志物，陽性可指導升階治療，陰性可考慮降階治療。EGFR突變陽性NSCLC完全性切除術后MRD陰性患者，可考慮降階輔助治療；EGFR突變Ⅳ期NSCLC經(jīng)過系統(tǒng)和局部治療后，影像學無可見或無代謝腫瘤病灶時，可在生物標志物指導下考慮藥物假期。
《非小細胞肺癌分子殘留病灶專家共識（2021年）》[4]中提及，在一項前瞻性多中心研究里，共納入101例帶有體細胞突變的早期乳腺癌患者，通過dPCR動態(tài)追蹤術后血漿ctDNA，結果清晰地表明ctDNA陽性與患者疾病復發(fā)密切相關，且ctDNA較影像學可提前預示疾病復發(fā)，中位時間達10.7個月。
在一項綜合FLAURA與AURA3研究的探索分析中[5]，通過dPCR檢測基線血及治療后3/6周血的EGFR突變狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)基線血陰性患者預后均較陽性者好，其次，基線血陽性患者若治療后3周達到ctDNA清零狀態(tài)預后較未清零者好（AURA3奧希替尼組：10.9個月vs. 5.7個月；FLAURA奧希替尼組：19.8個月vs. 11.3個月）。
一項研究[6]對6名NSCLC患者分析了監(jiān)測數(shù)據(jù)，dPCR結果很好地反映了疾病的進程和放射學反應。證實了dPCR多重檢測能夠縱向監(jiān)測液體活檢中的EGFR突變狀態(tài)，ctDNA濃度和突變豐度（FA）的變化反映了治療反應，與病程一致；因此，它可能是晚期NSCLC患者個性化治療管理中有用的監(jiān)測工具，對監(jiān)測EGFR酪氨酸激酶抑制劑治療具有重要意義。
在這項研究中[7]，選取了150名被診斷為局部結直腸癌患者，定制靶向的29基因NGS panel檢測原發(fā)性腫瘤突變。選擇突變頻率高的突變位點，再使用dPCR對血液中的ctDNA進行監(jiān)測，并跟蹤臨床的復發(fā)情況。結果顯示手術后和隨訪期間在血漿樣品中檢測到ctDNA的無病生存期（DFS）較差。在接受輔助化療的患者中，治療后ctDNA的存在與早期復發(fā)相關。在對ctDNA進行監(jiān)測可比影像學提前11.5月提示復發(fā)。
基于這些應用研究，NGS與數(shù)字PCR的組合應用，為實現(xiàn)腫瘤MRD更精準、更具成本效益且具有時效性的檢測帶來了新希望。在MRD檢測中，通過NGS測序識別個體特異突變位點，篩選高頻突變作為dPCR追蹤目標，指導dPCR針對特定基因突變進行高靈敏度檢測；dPCR則能對MRD進行定量分析，精確計算ctDNA拷貝數(shù)變化，直接提供突變率，更好地評估治療效果、預測復發(fā)風險和判斷疾病預后。相比動輒上萬的MRD方案，dPCR定向追蹤特定基因實時監(jiān)測的方案，目標明確，性價比更高。
新羿生物dPCR具備了本地化落地門檻低，運營成本低，實驗操作容易，報告出具快的特點，可以充分發(fā)揮dPCR檢測速度快，靈敏度高，可絕對定量，能夠獲得突變豐度信息的優(yōu)勢，非常適合于低豐度ctDNA持續(xù)動態(tài)低成本監(jiān)測。臨床研究證實了dPCR技術用于肺癌檢測的可行性和優(yōu)越性，為開發(fā)基于NGS-dPCR聯(lián)用的肺癌MRD監(jiān)測新策略筑牢了基礎。
數(shù)字PCR在肺癌MRD監(jiān)測領域展現(xiàn)出巨大的潛力，有望成為臨床醫(yī)生手中更精準、更經(jīng)濟、更便捷的監(jiān)測利器，為肺癌患者的治療與康復帶來更多曙光。
參考文獻：
[1]. 中華醫(yī)學會病理學分會,國家病理質控中心. 實體瘤分子殘留病灶檢測共識[J]. 中華病理學雜志, 2024, 53(11): 1088-1096.
[2]. 國家衛(wèi)生健康委辦公廳. 原發(fā)性肺癌診療指南（2022年版）[J]. 協(xié)和醫(yī)學雜志, 2022, 13(4): 549-570.
[3]. 吳一龍,陸舜,程穎,等.肺癌適應性治療中國專家共識[J]. 循證醫(yī)學, 2024, 24(4): 193-200.
[4]. 吳一龍,陸舜,程穎,等.非小細胞肺癌分子殘留病灶專家共識[J]. 循證醫(yī)學, 2021, 21(3): 129-135.
[5]. Gray JE, Ahn MJ, Oxnard GR, et al. Early Clearance of Plasma Epidermal Growth Factor Receptor Mutations as a Predictor of Outcome on Osimertinib in Advanced Non-Small Cell Lung Cancer; Exploratory Analysis from AURA3 and FLAURA. Clin Cancer Res, 2023, 29(17): 3340-3351.
[6]. De Kock R, Van Den Borne B, Youssef-El Soud M, et al. Therapy Monitoring of EGFR-Positive Non-Small-Cell Lung Cancer Patients Using ddPCR Multiplex Assays. J Mol Diagn, 2021, 23(4): 495-505.
[7]. Tarazona N, Gimeno-Valiente F, Gambardella V, et al. Targeted Next-generation Sequencing of Circulating-tumor DNA for Tracking Minimal Residual Disease in Localized Colon Cancer. Ann Oncol, 2019, 30(11):1804-1812.
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新羿生物成立于2015年，位于中關村科技園，是國家高新技術企業(yè)、北京市“專精特新”企業(yè)，專注于生命科學與分子診斷的自主創(chuàng)新，擁有在儀器、芯片、材料、試劑、軟件等領域的高水平研發(fā)團隊。公司發(fā)展迅速，申請國內外專利200余項、授權專利150余項，持續(xù)在權威期刊發(fā)表學術論文，承擔國家級科研基金。公司基于自主知識產(chǎn)權的數(shù)字PCR技術，已獲得首個及第二個共三項數(shù)字PCR儀NMPA III類醫(yī)療器械注冊證，三項診斷試劑NMPA III類醫(yī)療器械注冊證，其中感染和實體瘤液體活檢領域均為首個數(shù)字PCR診斷試劑III類注冊證，兩次獲得中國體外診斷優(yōu)秀創(chuàng)新產(chǎn)品金獎，榮獲中關村國際前沿科技創(chuàng)新大賽總冠軍，榮獲北京市科學技術二等獎。公司自主研發(fā)的開放式分子POCT一體機及qPCR快檢試劑均獲NMPA III類醫(yī)療器械注冊證。公司秉承“創(chuàng)新，讓精準觸手可及”的理念，發(fā)展多指標、高通量、自動化、防污染、成本低的先進技術，致力于成為領先的生命科學和分子診斷企業(yè)，服務于生命科學、精準醫(yī)療、藥物開發(fā)及健康管理。
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