發(fā)布日期：2022-09-05
乙肝病毒（HBV）感染者部分會(huì)同時(shí)感染丁肝病毒（HDV），對(duì)HDV的及時(shí)、準(zhǔn)確檢測(cè)是制定科學(xué)治療方案和實(shí)現(xiàn)臨床治愈的前提。首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院任鋒教授團(tuán)隊(duì)基于數(shù)字PCR平臺(tái)上開發(fā)了一種高敏可靠的HDV檢測(cè)方法，論文發(fā)表在國(guó)際期刊《Clinical and Translational Gastroenterology》上。
靈敏度和線性范圍驗(yàn)證
研究者又以30個(gè)HBV和HDV共感染者和14個(gè)HBV單獨(dú)感染者的共44個(gè)血液樣本為研究對(duì)象，分別驗(yàn)證了數(shù)字PCR法和RT-PCR法的檢出率（HDV感染陽(yáng)性是以抗HDV的IgG的Elisa檢測(cè)結(jié)果為判斷標(biāo)準(zhǔn)）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，30個(gè)HDV陽(yáng)性樣本中，數(shù)字PCR法檢出24個(gè)，RT-PCR法檢出10個(gè)（圖a）；14個(gè)HBV單獨(dú)感染樣本兩種方法都未檢出（圖b）。這些感染者都接受了抗病毒藥物治療，這可能影響了HDV核酸的檢出率。
對(duì)四種不同HBV相關(guān)疾病患者樣本的HDV檢測(cè)
研究者對(duì)各182名慢性乙肝（CHB）、肝硬化（LC）、肝細(xì)胞癌（HCC）和肝衰竭（LF）患者，共728個(gè)樣本進(jìn)行了抗HDV的IgG和IgM檢測(cè)，共檢出了26個(gè)抗HDV 的IgG陽(yáng)性，其中9個(gè)抗HDV的IgM陽(yáng)性。然后，研究者又分別用RT-PCR和數(shù)字PCR對(duì)26個(gè)抗HDV 的IgG陽(yáng)性樣本進(jìn)行了HDV的核酸檢測(cè)，結(jié)果顯示數(shù)字PCR檢出了9個(gè)陽(yáng)性，與抗HDV的IgM檢測(cè)結(jié)果一致；而RT-PCR法檢出4個(gè)陽(yáng)性（見下圖）。
從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，相較于RT-PCR法，數(shù)字PCR法有更高的檢出率，而且與IgM抗體檢測(cè)有著較高的一致性。原因可能是人體的IgM一般在病毒感染的早期產(chǎn)生，中期消失被IgG取代，與病毒核酸在人體內(nèi)存在周期有較高的重疊。此外，不同HBV相關(guān)疾病患者樣本的HDV核酸不同檢出率也表明HDV和HBV合并感染可顯著加速肝病的進(jìn)展。
數(shù)字PCR法檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性
研究者還對(duì)數(shù)字PCR法進(jìn)行了不同樣本的批次間重復(fù)性和批次內(nèi)重復(fù)性驗(yàn)證，結(jié)果都顯示了比較好的穩(wěn)定性，結(jié)果請(qǐng)見下圖：
總結(jié)
任峰教授科研團(tuán)隊(duì)研發(fā)的數(shù)字PCR HDV檢測(cè)方法展現(xiàn)了極高的檢測(cè)靈敏度和穩(wěn)定性，并且進(jìn)一步提示HDV和HBV合并感染與HBV相關(guān)疾病發(fā)展的相關(guān)性。新羿生物祝賀任峰教授取得的研究成果，并期待數(shù)字PCR技術(shù)在更多科學(xué)研究中發(fā)揮作用！
原文鏈接：https://doi.org/10.14309/ctg.0000000000000509
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