發(fā)布日期：2025-06-12
肺癌，這個(gè)在我國乃至全球都令人聞之色變的“健康殺手”，長期霸占著發(fā)病率和病死率的榜首。盡管靶向與免疫治療等現(xiàn)代醫(yī)學(xué)手段給患者帶來了新希望，但術(shù)后復(fù)發(fā)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移仍是制約長期生存率的關(guān)鍵因素，也成為每一位肺癌患者心中最深的恐懼。
在肺癌治療領(lǐng)域，微小病灶殘留（MRD）逐漸走入人們的視野。大量研究表明[1]，基于循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）的MRD比傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物或影像學(xué)方法更具優(yōu)勢，能更早鑒定出肺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的跡象，更早識別復(fù)發(fā)高風(fēng)險(xiǎn)患者，為提前干預(yù)創(chuàng)造寶貴機(jī)會，在肺癌患者的預(yù)后預(yù)測、復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)評估及輔助治療指導(dǎo)等方面發(fā)揮著舉足輕重的作用。
目前，基于NGS的ctDNA突變檢測，是當(dāng)下實(shí)體瘤MRD檢測的常用方法。但不得不說，MRD監(jiān)測的價(jià)格并不親民。市場上主流的MRD監(jiān)測套餐，多為1+n，需在兩年內(nèi)完成，這樣一套下來價(jià)格萬元級別。若再增加監(jiān)測次數(shù)，費(fèi)用還會水漲船高，這無疑給患者和家屬帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此，如何實(shí)現(xiàn)術(shù)后患者高靈敏、低成本且動態(tài)化的MRD監(jiān)測，至今仍是精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域亟待攻克的核心難題。
在此背景下，基于數(shù)字PCR（dPCR）聯(lián)合NGS對原發(fā)腫瘤患者的常見驅(qū)動基因ctDNA進(jìn)行MRD復(fù)發(fā)監(jiān)測逐漸成為一種可行性方法。盡管目前有多種NGS的Panel可供選擇，但由于很多基因或者位點(diǎn)的臨床意義不明確而被排除。非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）占全部肺癌85%[2]，而表皮生長因子受體（EGFR）在NSCLC治療中是極為關(guān)鍵的靶點(diǎn)。相關(guān)研究表明，dPCR為攜帶常見驅(qū)動基因（如EGFR）的手術(shù)切除NSCLC患者的MRD檢測提供了一條可行路徑，其準(zhǔn)確性也得到了相關(guān)分析結(jié)果的有力支撐。
《實(shí)體瘤分子殘留病灶檢測共識（2024年）》指出，基于NGS的MRD檢測因高通量、全面性和高靈敏度，成為當(dāng)下主流。不過，基于dPCR的MRD個(gè)性化定制，能對低豐度ctDNA進(jìn)行精準(zhǔn)絕對定量，同樣具有獨(dú)特價(jià)值。
2024年《肺癌適應(yīng)性治療中國專家共識》[3]首次推薦ctDNA-MRD作為適應(yīng)性治療的標(biāo)志物，陽性可指導(dǎo)升階治療，陰性可考慮降階治療。EGFR突變陽性NSCLC完全性切除術(shù)后MRD陰性患者，可考慮降階輔助治療；EGFR突變Ⅳ期NSCLC經(jīng)過系統(tǒng)和局部治療后，影像學(xué)無可見或無代謝腫瘤病灶時(shí)，可在生物標(biāo)志物指導(dǎo)下考慮藥物假期。
《非小細(xì)胞肺癌分子殘留病灶專家共識（2021年）》[4]中提及，在一項(xiàng)前瞻性多中心研究里，共納入101例帶有體細(xì)胞突變的早期乳腺癌患者，通過dPCR動態(tài)追蹤術(shù)后血漿ctDNA，結(jié)果清晰地表明ctDNA陽性與患者疾病復(fù)發(fā)密切相關(guān)，且ctDNA較影像學(xué)可提前預(yù)示疾病復(fù)發(fā)，中位時(shí)間達(dá)10.7個(gè)月。
在一項(xiàng)綜合FLAURA與AURA3研究的探索分析中[5]，通過dPCR檢測基線血及治療后3/6周血的EGFR突變狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)基線血陰性患者預(yù)后均較陽性者好，其次，基線血陽性患者若治療后3周達(dá)到ctDNA清零狀態(tài)預(yù)后較未清零者好（AURA3奧希替尼組：10.9個(gè)月vs. 5.7個(gè)月；FLAURA奧希替尼組：19.8個(gè)月vs. 11.3個(gè)月）。
一項(xiàng)研究[6]對6名NSCLC患者分析了監(jiān)測數(shù)據(jù)，dPCR結(jié)果很好地反映了疾病的進(jìn)程和放射學(xué)反應(yīng)。證實(shí)了dPCR多重檢測能夠縱向監(jiān)測液體活檢中的EGFR突變狀態(tài)，ctDNA濃度和突變豐度（FA）的變化反映了治療反應(yīng)，與病程一致；因此，它可能是晚期NSCLC患者個(gè)性化治療管理中有用的監(jiān)測工具，對監(jiān)測EGFR酪氨酸激酶抑制劑治療具有重要意義。
在這項(xiàng)研究中[7]，選取了150名被診斷為局部結(jié)直腸癌患者，定制靶向的29基因NGS panel檢測原發(fā)性腫瘤突變。選擇突變頻率高的突變位點(diǎn)，再使用dPCR對血液中的ctDNA進(jìn)行監(jiān)測，并跟蹤臨床的復(fù)發(fā)情況。結(jié)果顯示手術(shù)后和隨訪期間在血漿樣品中檢測到ctDNA的無病生存期（DFS）較差。在接受輔助化療的患者中，治療后ctDNA的存在與早期復(fù)發(fā)相關(guān)。在對ctDNA進(jìn)行監(jiān)測可比影像學(xué)提前11.5月提示復(fù)發(fā)。
基于這些應(yīng)用研究，NGS與數(shù)字PCR的組合應(yīng)用，為實(shí)現(xiàn)腫瘤MRD更精準(zhǔn)、更具成本效益且具有時(shí)效性的檢測帶來了新希望。在MRD檢測中，通過NGS測序識別個(gè)體特異突變位點(diǎn)，篩選高頻突變作為dPCR追蹤目標(biāo)，指導(dǎo)dPCR針對特定基因突變進(jìn)行高靈敏度檢測；dPCR則能對MRD進(jìn)行定量分析，精確計(jì)算ctDNA拷貝數(shù)變化，直接提供突變率，更好地評估治療效果、預(yù)測復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)和判斷疾病預(yù)后。相比動輒上萬的MRD方案，dPCR定向追蹤特定基因?qū)崟r(shí)監(jiān)測的方案，目標(biāo)明確，性價(jià)比更高。
新羿生物dPCR具備了本地化落地門檻低，運(yùn)營成本低，實(shí)驗(yàn)操作容易，報(bào)告出具快的特點(diǎn)，可以充分發(fā)揮dPCR檢測速度快，靈敏度高，可絕對定量，能夠獲得突變豐度信息的優(yōu)勢，非常適合于低豐度ctDNA持續(xù)動態(tài)低成本監(jiān)測。臨床研究證實(shí)了dPCR技術(shù)用于肺癌檢測的可行性和優(yōu)越性，為開發(fā)基于NGS-dPCR聯(lián)用的肺癌MRD監(jiān)測新策略筑牢了基礎(chǔ)。
數(shù)字PCR在肺癌MRD監(jiān)測領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的潛力，有望成為臨床醫(yī)生手中更精準(zhǔn)、更經(jīng)濟(jì)、更便捷的監(jiān)測利器，為肺癌患者的治療與康復(fù)帶來更多曙光。
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●關(guān)于新羿生物●
新羿生物成立于2015年，位于中關(guān)村科技園，是國家高新技術(shù)企業(yè)、北京市“專精特新”企業(yè)，專注于生命科學(xué)與分子診斷的自主創(chuàng)新，擁有在儀器、芯片、材料、試劑、軟件等領(lǐng)域的高水平研發(fā)團(tuán)隊(duì)。公司發(fā)展迅速，申請國內(nèi)外專利200余項(xiàng)、授權(quán)專利150余項(xiàng)，持續(xù)在權(quán)威期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論文，承擔(dān)國家級科研基金。公司基于自主知識產(chǎn)權(quán)的數(shù)字PCR技術(shù)，已獲得首個(gè)及第二個(gè)共三項(xiàng)數(shù)字PCR儀NMPA III類醫(yī)療器械注冊證，三項(xiàng)診斷試劑NMPA III類醫(yī)療器械注冊證，其中感染和實(shí)體瘤液體活檢領(lǐng)域均為首個(gè)數(shù)字PCR診斷試劑III類注冊證，兩次獲得中國體外診斷優(yōu)秀創(chuàng)新產(chǎn)品金獎，榮獲中關(guān)村國際前沿科技創(chuàng)新大賽總冠軍，榮獲北京市科學(xué)技術(shù)二等獎。公司自主研發(fā)的開放式分子POCT一體機(jī)及qPCR快檢試劑均獲NMPA III類醫(yī)療器械注冊證。公司秉承“創(chuàng)新，讓精準(zhǔn)觸手可及”的理念，發(fā)展多指標(biāo)、高通量、自動化、防污染、成本低的先進(jìn)技術(shù)，致力于成為領(lǐng)先的生命科學(xué)和分子診斷企業(yè)，服務(wù)于生命科學(xué)、精準(zhǔn)醫(yī)療、藥物開發(fā)及健康管理。
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