發(fā)布日期：2021-01-15
摘要
2021年1月7日，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院輸血研究所劉忠團(tuán)隊(duì)、清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院郭永團(tuán)隊(duì)和海軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院張偉團(tuán)隊(duì)合作，在Journal of Translational Medicine發(fā)表了題為 “Analysis of viral load in different specimen types and serum antibody levels of COVID?19 patients” 的文章。
該研究收集了病程天數(shù)7-69天的COVID-19患者的鼻咽拭子、肛拭子、唾液、血液和尿液樣本，利用數(shù)字PCR檢測(cè)不同部位樣本中SARS-CoV-2的病毒載量；同時(shí)檢測(cè)這些患者血清中N蛋白IgM、IgG抗體水平和S蛋白受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域（RBD）的IgG抗體效價(jià)，研究COVID-19患者抗體產(chǎn)生與病毒載量之間的相關(guān)性。
結(jié)果顯示：
1）鼻咽拭子是檢測(cè)SARS-CoV-2的最佳樣本類型；
2）部分患者的鼻咽拭子樣本核酸檢測(cè)呈陰性后，但其它部位的樣本仍然是陽性，提示針對(duì)恢復(fù)期患者的核酸檢測(cè)，除了鼻咽拭子也應(yīng)該收集其他部位的樣本，比如痰液、肛拭子；
3）N蛋白IgM、IgG抗體水平和S蛋白R(shí)BD的IgG抗體效價(jià)與病程天數(shù)和鼻咽拭子病毒載量均沒有直接的線性關(guān)系，提示抗體水平可能受到多方面因素的影響。
研究背景
病毒核酸檢測(cè)結(jié)果指導(dǎo)COVID-19患者的診斷，而準(zhǔn)確診斷患者的其中一個(gè)重要條件是采集高質(zhì)量的核酸樣本。由于不同部位的樣本都能夠檢測(cè)到病毒，有必要研究不同部位臨床樣本的特征，以指導(dǎo)采樣部位的選擇。此外，病毒特異性抗體檢測(cè)對(duì)于輔助診斷、鑒別診斷、病程發(fā)展與治療效果監(jiān)測(cè)均有重要意義，目前已有研究人員對(duì)抗體動(dòng)力學(xué)進(jìn)行相關(guān)研究，但不同病程天數(shù)的患者的抗體水平和抗體水平與病毒載量之間的關(guān)系仍然不明確。
方法與結(jié)果
本研究收集37例COVID-19患者的鼻咽拭子、肛拭子、唾液、血液和尿液樣本各一份，共185份樣本，使用數(shù)字PCR（圖1）對(duì)這些樣本進(jìn)行核酸的檢測(cè)與絕對(duì)定量，并使用ELISA檢測(cè)這些患者血清中N蛋白IgM、IgG抗體水平和S蛋白R(shí)BD的IgG抗體效價(jià)。
圖1 數(shù)字PCR方法介紹
研究結(jié)果如下：
1）在不同樣本類型的檢測(cè)中，鼻咽拭子的核酸陽性率和平均病毒載量均最高（圖2），說明鼻咽拭子是檢測(cè)SARS-CoV-2的最佳樣本類型。
圖2 病毒核酸檢測(cè)結(jié)果。A）不同患者不同部位樣本的核酸檢測(cè)結(jié)果，x軸為不同部位樣本，y軸為患者ID和病程天數(shù)，y軸由下至上病程天數(shù)遞增，以病毒載量為每個(gè)單元格著色；（B）不同部位樣本的病毒載量，平均拷貝數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差顯示在圖中。
2）由于部分患者的鼻咽拭子樣本檢測(cè)呈陰性后，個(gè)別不同部位的樣本仍然是陽性，提示針對(duì)恢復(fù)期患者的核酸檢測(cè)觀察，除了鼻咽拭子也應(yīng)該收集其他部位的樣本，以更準(zhǔn)確地確認(rèn)患者的康復(fù)情況。其中，除了常見的鼻咽拭子、痰液以外，肛拭子也是可考慮的樣本類型。
3）由于N蛋白IgM、IgG抗體水平和S蛋白R(shí)BD的IgG抗體效價(jià)與病程天數(shù)和鼻咽拭子病毒載量均沒有直接的線性關(guān)系，提示抗體水平可能受到多方面因素的影響。
研究結(jié)論
本研究對(duì)COVID-19患者不同類型樣本的核酸陽性檢出率和病毒載量進(jìn)行分析，并研究了患者體內(nèi)抗體水平和病毒載量之間的關(guān)系。本研究對(duì)深入了解抗體應(yīng)答機(jī)制和改善病毒核酸采樣和檢測(cè)提供了科學(xué)依據(jù)。
作者介紹
李玲、陳芊如和曾葭為該研究的共同第一作者，劉忠、郭永和張偉為該研究的共同通訊作者。
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